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更新時(shí)間：2021-01-27
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養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒也可用于環(huán)境檢測(cè)非洲豬瘟試劑盒由風(fēng)途科技為您供應(yīng)更高效。養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒也可用于環(huán)境檢測(cè)非洲豬瘟試劑盒均已經(jīng)獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)品批準(zhǔn)發展，可以滿足非洲豬瘟核酸現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)需求發展基礎√峁┝擞辛χ?？啥靠焖傩竽令惣膊≡\斷如非洲豬瘟現場、大力發展、豬瘟帶來全新智能、豬藍(lán)耳不折不扣、偽狂犬等疾病，廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)充分發揮、屠宰場(chǎng)選擇適用、食品加工廠、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)設計、農(nóng)業(yè)農(nóng)村交流、畜牧、檢驗(yàn)檢疫單位使用提供堅實支撐。
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒（PCR熒光探針?lè)ǎ?/span>
英文名稱：Diagnostic Kit for African Swine Fever Virus （PCR Fluorescence Probing）
［預(yù)期用途］
本試劑盒主要用于檢測(cè)疑似感染豬抗凝血及臨床病料中的非洲豬瘟病毒（ASFV, African Swine Fever
Virus）核酸，適用于非洲豬瘟病毒的檢測(cè)、輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查信息化技術。
【試劑盒組分】
1發揮作用、試劑盒組成及貯藏條件
名稱 | 50 T | 貯藏條件 |
1、反應(yīng)液A | ImL | -20°C |
2逐步顯現、反應(yīng)液B | ImL | |
3銘記囑托、陽(yáng)性對(duì)照 | 250μL | |
4、陰性對(duì)照 | 250μL | |
5自動化裝置、PCR反應(yīng)液 | 850μL | |
6示範、酶混合液 | 150μL |
2、需自備材料：生理鹽水有很大提升空間、無(wú)菌槍頭運行好、熒光PCR反應(yīng)管、記號(hào)筆等可能性更大。
【操作步驟】
一部署安排、樣品制備
1、 血液樣品：采集抗凝血（抗凝劑為EDTA）或血清樣品技術，編號(hào)備用推廣開來。
2、 組織樣品：采集脾臟示範推廣、肝臟堅持好、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品或軟蜱0.1g（黃豆粒大写蠓黾?。┨匦?，眼科剪剪碎于組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨，再加1mL生理鹽水混勻交流研討，4°C條件下8000 rpm/分鐘離心2分鐘更加完善，取上清液于滅菌離心管中，編號(hào)備用建設應用。
二支撐作用、DNA提取
取反應(yīng)液A 20μL分別加入到新的1.5mL離心管，加入抗凝而或血清或組織上清液2μL混勻動力，室溫（20°C左右）靜置3分鐘同時，加入反應(yīng)液B 20μL,吹打混勻即可，若為抗凝全血效高性，則需8000rpm/分鐘再離心2分鐘后做為待檢DNA溶液模式。
二、PCR擴(kuò)增
1提升、配液：取出PCR反應(yīng)液高品質、酶混合液，在室溫*融化后，充分混勻資源優勢，瞬離高效利用，可將酶混合液全取岀直接加入到PCR反應(yīng)液中，充分混勻估算，瞬離后按每份20μL分裝使用講理論；或按照每份PCR反應(yīng)液17μL, 酶混合液3μL的比例取一定的試驗(yàn)用量，混合兩種反應(yīng)液,瞬離后按照每份20μL分裝到熒光PCR 反應(yīng)管中不要畏懼，剩余試劑立即凍存服務為一體；（操作過(guò)程要注意避光）
2、加樣擴(kuò)增：分別向上述PCR反應(yīng)管中加入5μL樣本 DNA或陰性對(duì)照或陽(yáng)性對(duì)照逐漸顯現，混勻并瞬離, 放入熒光PCR儀上運(yùn)行以下程序：
步驟 | 條件 | 循環(huán)數(shù) |
UNG處理 | 50°C： 2分鐘 | 1 |
預(yù)變性 | 95°C： 3分鐘 | 1 |
預(yù)擴(kuò)増 | 95°C： 8 秒 55C： 8 秒 | 5 |
PCR擴(kuò)增 | 95°C： 8 秒 55°C： 8 秒 | 40 |
熒光通道選擇FAM,在40循環(huán)階段每個(gè)循壞的55°C時(shí)收集熒光信號(hào)全會精神。設(shè)置擴(kuò)增體系為25μL,同時(shí)要選擇 passive reference 和 quencher 為 none 的模式。
(注:若熒光PCR儀(如ABI7500)按說(shuō)明書中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時(shí)間短無(wú)法運(yùn)行,可將預(yù)擴(kuò)增和PCR擴(kuò)增條件變更為95°C： 5秒 55°C：30秒更默契了。)
當(dāng)前位置：
