FT-ZWSJ非洲豬瘟熒光定量PCR檢測試劑盒，已成功列入農(nóng)業(yè)農(nóng)村中國動物疫病預(yù)防控制中心

FT-ZWSJ非洲豬瘟熒光定量PCR檢測試劑盒

【獸藥名稱】

通用名稱：非洲豬瘟病毒熒光PCR快速檢測試劑盒

商品名稱：無

漢語拼音：Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Kuaisu Jiance Shijihe

英文名稱：Real-time PCR for Rapid Detection of African Swine Fever Virus

【主要成分與含量】

【作用與用途】本試劑盒適用于豬血液、豬肉組織重要的角色、淋巴結(jié)、脾臟等樣本中非洲豬瘟病毒核酸的檢測方式之一。

【用法與判定】

1 用法

1.1 樣品處理及模板準(zhǔn)備

1.1.1 樣品處理

·組織樣品處理：分別從豬肉組織、淋巴結(jié)新型儲能、脾臟不同位置取樣，用手術(shù)剪剪碎混勻后取0.1g于研磨器中研磨新品技，加入1.5ml生理鹽水繼續(xù)研磨範圍，待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5ml無菌離心管，12000 r/min離心2分鐘紮實做，取上清200μl備用空間廣闊。

·血液樣品無需處理，取200μl備用提供深度撮合服務。

1.1.2 模板準(zhǔn)備

·根據(jù)不同的樣本類型服務品質，按照下表準(zhǔn)備相應(yīng)的樣本用量。

·將樣本加入到1.5 ml離心管中組成部分，加入下表推薦體積的Solution A集成，渦旋震蕩20 s，并按照下表推薦的處理方法互動講，室溫靜置3-5 min穩定性，或95℃金屬浴振蕩孵育3-5 min。

·樣本充分裂解后（95℃金屬浴振蕩孵育的樣本需恢復(fù)室溫）過程中，加入下表推薦體積的Solution B去突破，并渦旋震蕩30 s，12000rpm離心2min達到，上清即為模板DNA智能設備。

·處理后的樣本如在2小時內(nèi)進(jìn)行下一步試驗，請于4℃保存蓬勃發展，如不能立即進(jìn)行下一步試驗特點，請于-20℃保存。

備注：組織樣本加入10倍體積的生理鹽水制成組織勻漿液后開放要求，可按照血液樣本的處理方法進(jìn)行處理向好態勢。

1.1.3可利用商品化試劑盒提取核酸進(jìn)行反應(yīng)，效果更佳

1.2 熒光PCR擴增

1.2.1 試劑準(zhǔn)備

實驗前20分鐘將試劑從冰箱取出并恢復(fù)至室溫服務機製，使其*融化貢獻力量，充分混勻后瞬時離心去除管壁吸附液體使用。

1.2.2 配制反應(yīng)體系

2 判定

2.1 合理調(diào)整閾值線，不同儀器可根據(jù)儀器噪音情況進(jìn)行調(diào)整發行速度。

2.2 試劑盒有效性判定

·陰性對照：無Ct值更加堅強，線形為直線或微斜，無明顯指數(shù)增長性能。

·陽性對照：Ct值≤30初步建立，有明顯指數(shù)增長，呈典型的S型曲線供給。

2.3 樣本結(jié)果判定

·樣本檢測結(jié)果Ct值≤38的方法，有明顯指數(shù)增長，判定為陽性進行探討，表明樣本中檢測出非洲豬瘟病毒落到實處。

·樣本檢測結(jié)果38＜Ct≤40，判定為可疑最新。應(yīng)對樣本進(jìn)行復(fù)測技術創新，若復(fù)測結(jié)果Ct值仍在38~40之間，有明顯指數(shù)增長製造業，則判定為陽性優化服務策略，否則為陰性。

·樣本檢測結(jié)果無Ct值發展基礎，判定為陰性兩個角度入手，表明樣本中未檢測出非洲豬瘟病毒。

FT-ZWSJ非洲豬瘟試劑盒實拍

【注意事項】

（1）實驗前請仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書顯示，嚴(yán)格按步驟執(zhí)行創新為先，不使用本試劑盒提供的組份或不按照說明書進(jìn)行實驗可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。

（2）所有試劑應(yīng)在規(guī)定溫度儲存科普活動。-20℃保存的試劑在使用前應(yīng)充分混勻創新延展。試劑盒反復(fù)凍融次數(shù)不宜超過5次。

（3）實驗操作應(yīng)按照國家有關(guān)臨床基因擴增實驗室管理規(guī)范執(zhí)行長期間，實驗過程應(yīng)分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)基本情況、樣本制備區(qū)、核酸擴增區(qū)）高端化，各區(qū)物品為力量，不得交叉使用，避免污染提單產。

（4）操作臺深入實施、移液器、離心機等儀器用品應(yīng)經(jīng)常用1%次氯酸鈉發展空間、75%乙醇或紫外燈進(jìn)行消毒效果。耗材應(yīng)進(jìn)行無酶處理有所應。

（5）待檢樣本、試劑盒組份及實驗中的廢棄物需按照具有潛在傳染性物質(zhì)處理方法進(jìn)行處理合作關系。

（6）為防止熒光干擾著力提升，應(yīng)避免使用含熒光物質(zhì)的手套，避免用手直接接觸傳遞，預(yù)防交叉污染融合。

（7）檢測結(jié)果為陰性，并不*代表為非感染狀態(tài)相關性，具體診斷需結(jié)合獸醫(yī)臨床完成的事情。

（8）產(chǎn)生假陰性的可能原因為：待檢樣本在采集、運輸穩定、保存及核酸提取過程中操作不當(dāng)造成DNA降解適應性；樣本中核酸濃度低于低檢測限；病毒待測靶基因出現(xiàn)變異稍有不慎；未經(jīng)驗證的其他干擾因素。

（9）產(chǎn)生假陽性的可能原因為：待檢樣本采集等地、運輸及核酸提取過程中發(fā)生交叉污染最為顯著。

【規(guī)格】 50反應(yīng)/盒

【貯藏及有效期】 試劑盒-20℃以下冷凍避光保存，有效期為12個月規定。